こんにちは。
下記の用に設定してVB.NETからExcelをオープン、クローズさせています。
1回目にオープンさせる時はエラーなく上手くいくのですが
2回目にオープンさせるときに

xlBook = xlBooks.Open(xlFilePathO)　
↑この箇所で
「オブジェクト参照がオブジェクト インスタンスに設定されていません。」
とエラーになります。
Publicで宣言してあるので再度宣言しなくても大丈夫だと思うのですが・・・。
タスクで見てみてもExcel自体は立ち上がってるようです。
何が問題なのでしょうか？

Public xlApp As New Excel.Application
Public xlBooks As Excel.Workbooks = xlApp.Workbooks
Public xlBook As Excel.Workbook = Nothing
Public xlSheets As Excel.Sheets = Nothing
Public xlSheet As Excel.Worksheet = Nothing

Public Function ExcelOpen()

    xlFilePathO = "TEST1.xls"

    xlBook = xlBooks.Open(xlFilePathO)
    xlSheets = xlBook.Worksheets

    '// Excelの表示
    xlApp.Visible = True

End Function

Public Sub ExcelClose()

    '==================  終了処理  =====================  
    MRComObject(xlSheet)            'xlSheet の解放
    MRComObject(xlSheets)           'xlSheets の解放
    xlBook.Close(False)             'xlBook を閉じる
    MRComObject(xlBook)             'xlBook の解放
    MRComObject(xlBooks)            'xlBooks の解放
    xlApp.Quit()                    'Excelを閉じる
    MRComObject(xlApp)              'xlApp を解放

End Sub

> Public xlApp As New Excel.Application

この変数は、初期値として New された状態になりますが、
Quit で終了した後はどうされるのでしょうか?

新たな Excel を起動するためにもう一度 New を行うか、あるいは、
起動済みの Excel を取得するための GetObject 等を呼び出すなどの
作業が必要なはずですが、提示されたコードには、そうした記述は無いようですし。

こちらのサイトの
「.NETからExcelの基本的な操作方法」の
Excel起動を元にしています。

１つ目の処理が終った後に

        MRComObject(xlSheet)            'xlSheet の解放
        MRComObject(xlSheets)           'xlSheets の解放
        xlBook.Close(True)             'xlBook を閉じる
        MRComObject(xlBook)             'xlBook の解放
        MRComObject(xlBooks)            'xlBooks の解放
        xlApp.Quit()                    'Excelを閉じる
        MRComObject(xlApp)              'xlApp を解放

で閉じているだけです。
他の処理は何もしてません・・・。

特に追加質問が無いという事は、先に指摘した点は
理解していただけたと思って良いのでしょうか。

要は、変数の初期化の時点で、オブジェクトの生成を行ってありますが、
2回目の起動前には、そのオブジェクトの生成を行っていないために、
複数回の処理ができないのではないでしょうか、という話ですね。


> で閉じているだけです。
> 他の処理は何もしてません・・・。
閉じる事が問題なのではなく、呼び出し時の問題です。

Public xlApp As New Excel.Application
Public xlBooks As Excel.Workbooks = xlApp.Workbooks

のように、変数宣言と同時に初期化を行うと、最初の1回目は良いですが、
2 回目以降は、初期化されません。そこで、起動のたびに処理されるよう、
まずはこの宣言部分を
　Public xlApp As Excel.Application
　Public xlBooks As Excel.Workbooks
に修正したうえで、Function ExcelOpen() As Object の中で、最初に
　　xlApp = New Excel.Application()
　　xlBooks = xlApp.Workbooks
を記述しておく必要がありますよ、というのが、先の
>> 新たな Excel を起動するためにもう一度 New を行うか
という一文が指し示す意味となります。

説明よくわかりました。

もう少し教えて下さい。

�@Excel起動

�A処理（Excelに書込み）

�BExcel閉じる

この�@〜�Bの処理を複数回行っています。
魔界の仮面弁士 さんの記述通りに修正しました。

>Public xlApp As Excel.Application
>Public xlBooks As Excel.Workbooks

>xlApp = New Excel.Application()
>xlBooks = xlApp.Workbooks

タスクで確認すると３回処理を行うたびにExcelが立ち上がっています。
閉じる処理が上手くいってないのでしょうか？
閉じる処理は先ほど記述したものと変更していません・・・。

下記は、参考になりませんか？
http://www.hanatyan.sakura.ne.jp/dotnet/Excel07.htm#no7

参考にしたんですけど・・・
タスクで見ると複数立ち上がったままです。

全ての処理が終ると全部消えるのですが・・・。
原因がわかりませんでした。